25, RUE DU DOCTEUR ROUX

(XV. Arrond')

TeibDhone : SeGUR 01-10

Pi.ris, le I4 f6vrier

Dr. S. SYIEGBLDiiAN
Dept of Bacteriology
University of Illinois
URBANA
Illinois

Hon cher Sol8

   Je te remercie pour llorthonitroph6nyl galactoside qui va
nous rendre de tr6s grands services. Je tlai fait envoyer , par
avion, IO0 rng de notatine. Comme nous en fabriquons assee re-
guli&rerr;ent au laboratoire, je pourrai tlen envoyer dfautre d'ici
quelque temps .

  Pour llemploi, il faut proceder de la mani6re suivante :
faire une solution dans l'eau distill4e & 2 mg/cc.
se dissout bien. I1 peut rester un l6ger trouble, et on peut
clarifier par centrifugation. Cette solution doit avoir une
activit6 correspondant a environ 100.000 md 02 par heure,
pH 6,8, en tampon phosphate M/IO additionne de NaN3 E/50.  Le
pH optimum de la notatine est aux environs de 6, et on peut l'u-
tiliser ais6ment jusque vers pH 7.

    Your les nesures d'activitk enzyrnatique (lactase, amylo-
maltase, etc..) on peut proceder de 2 faqons differentes :

  a) systeme de 2 enzymes. Dans ce cas, la notatine et la
prdparation enzymatique sont utilis6es simltanement dans un
Warburg. I1 est essentiel pour obtenir de bons r6sultats que
l'activitk potentielle de la notatine soit entre IO et 20 fois
sup6rieure & lIactivit6 de l'eneyme hydrolytique. On evploiera
par exemple O,I-O,2 cc d'une solution de notatine a 2 rng/cc pour
une quarttit6 de lactase libdrant 25
C;ette technique rapide donne d'excel ents r6sultats et permet de
suivre la cinetique, mais elle est xoins precise que la seconde
et utilise une plus grande quantite de notatine.

tenps, l'hydrolyse, et dans un second, aprhs avoir d6truit l'ac-
tivit6 enzymatique, a faire le dosage du glucose par la notatine
en Warburg.

et le tr6halose. Llac ivit6 en maltose est excessivement faible,
sur dlautres sucres

Le produit

280,

de glucose par heure.

r

b) La seconde technique consiste a faire, dans un premier

LIGchantillon que je t'envoie nfa pas d'activit6 sensible

le glucose, sad le xylose, le maltose

... 0..

T

et l'erreur peut stre facilement corrigke & l'aide d'un tdmoin.
LtactivitG sur xylose est 6galement trGs faible. Ltactivitk en
trehalose est notable, mais je ne pense pas que cela doive te
giber.

tine. Si vous n'avez pas de souche bonne productrice, cela ne
Ee surprend pas. Nous n'avons rkussi a la faire ici que lorsque
nous avons eu entre les nains la souche de Coulthard. Maintenant,
nous arrivons a en preparer sans difficulte, rdgulikrement des
lots de I50 Itlg a peu pris, obtenus a partir de IO litres de mi-
lieu de culture. La m6thode suivje est essentiellement celle de
Coulthard, a ceci pr8s, que l'on ne fait pas de concentration
prealable. Pour les dilutions et les volunes de liquide, on
tient compte grossikrement du fait qu'on a comrcenc6 avec IO litres
au lieu de I50 conme le fait Coulthard.  Je vais te faire envoyer
egalement la souche en question. J'espBre cependant pouvoir or-
ganiser une production plus massive dtici quelque temps, et je me
denande s'il ncy aurait pas avantage pour toi comme pour moi ce
que je me sp6cialise dans la fabrication de la notatine, et toi
dans celle des galactosides.

   Nous avons beaucoup de choses nouvelles ici. Je ne sais pas
ce que Kichael a pu t'an 6crire deja. Comme  cette lettre est
assez urgente, je remets a plus tard de plus amples commentaires.

bien install6 et que tu avais tout lieu d'stre satisfait de8
moyens de travail mis a ta disposition.

1 adaptation enzymatique , mais ce sera probablenent bien autre
chose que ce que nous avions pu imaginer au debut.

Xichael me dit que vous avez eu du mal prGparer la nota-

Jlai et6 tr6s heurewc dtapprendre bar Idichael que tu 6tais

Je crois que nous finirons par coniprendre ce que c'eat que

Bien amicalenent a toi,